الفهرس يوجد فقط 14 صفحة متاحة للعرض العام
 |  | from | 157 |  |  |
| | | from | 157 | | |
المستخلص
لقد بدأت هذه الدراسة بجمع 30 عينة تربة رملية من ستة مناطق مختلفة تمثل الصحراء الشرقية والصحراء الغربية بمحافظتى بنى سويف والجيزة في جمهورية مصر العربية. تم جمع 15 عينة من وادى سنور وهو أحد الوديان الكبيرة في صحراء مصر الشرقية يمتد من البحر الاحمر شرقاً الي نهر النيل غرباً و15 عينة أخرى من صحراء دهشور وهى جزء من صحراء مصر الغربية والتى تمتد من المنطقة التاريخية بسقارة الي واحة الفرافرة غرباً.
تم الحصول علي العوامل المناخية لمنطقتىِ الدراسةَ من محطات الأرصاد الجوية بمحافظتى بنى سويف والجيزة والتي تتضمن درجةِ الحرارة، كمية المطر والرطوبة النسبية. أيضاً تم دراسة خصائص التربةَ والتى تشمل تقدير نسبة الكربونِ العضويِ، الكلوريدات، الكربونات الكلية، البيكربونات الذائبة، الأملاحَ القابلة للذوبانَ والاس الهيدروجيني في عيناتِ التربة.
ولقد بينت العوامل المناخية أن كلتا المنطقتين تقعا في المنطقةِ شديدة الجفاف والقاحلةِ جداً بمتوسطِ سقوط أمطار أقل مِنْ 2 مليمترِ/سَنَة أثناء فصل الشتاء وأن كلتا المنطقتين تميزتا بمناخ حار وجاف وخالى من المطر خلال فصل الصيف. و قد سّجلت أعلي درجة حرارة وهى 46.4 درجة سيليزيه خلال شهر يوليو. ولقد أثبتت خصائص التربةَ أن كل عينات التربة التي جّمعت من المواقع المختلفة كانت تربه رملية مائله للقلوية وأن نسبة الكربونِ العضويِ والكلوريدات والبيكربونات الذائبة والأملاحَ القابلة للذوبانَ كَانتْ أعلى نسبياً في العيناتِ مِنْ صحراءِ دهشور (الصحراء الغربية) بالمقارنة بالعينات من وادي سنور (الصحراء الشرقية).
قمنا بعزل الاكتينوميسيتات الصحراوية من عينات التربه الرمليه علي ثلاثة أوساط غذائية مختلفة وهى جلوكوز/مستخلص خميرة، مستخلص التربه ووسط غذائي جديد قمنا بتكوينه علي اساس اقل كمية من المغذيات وسمي المغذّي المنخفض (MM). وقد أوضحت النتائج أن هذا الوسط الغذائي الجديد (MM) مناسب جداً لنمو أعداد كبيرة وأنواع مختلفة من
الاكتينوميسيتات ويقلل نسبة البكتريا والفطريات. وكان من الواضح أن عدد الاكتينوميسيتات قد تأثر بنسبة الكربونات الكلية، الكلوريدات والأملاحَ القابلة للذوبانَ في عينات التربة.
ولقد تم عزل وتنقية عدد من الاكتينوميسيتات علي اساس الاختلاف في الشكل الظاهري. وتم اختبار قدرة هذه الكائنات علي إظهار نشاط حيوى ضد مجموعة من كائنات الاختبار المعدية والتى تشمل بعض أنواع البكتيريا الموجبة لصبغة جرام والسالبة لصبغة جرام وكذلك بعض أنواع الخميرة. وقد استخدم قطر مناطق التثبيط حول أقراص الاكتينوميسيتات كمؤشر لوجود نشاط مضاد للميكروبات.
وقد أوضحت النتائج أنه من بين 75عزلة من الاكتينوميسيتات الصحراويه أعطت 32 عزلة نشاطاً مضاداً للبكتيريا الموجبة لصبغة جرام والسالبة لصبغة جرام والخميرة. ولقد تم تصنيف الاكتينوميسيتات الصحراوية إلي 4 أقسام علي أساس تأثيرهم علي كائنات الاختبار المعدية المختلفة حيث كانت نسبة الاكتينوميسيتات الصحراوية التي أعطت نشاطا مضاداًَ للبكتيريا الموجبة لصبغة جرام فقط 43.75% وأعطت نسبة 28.13% من الاكتينوميسيتات الصحراوية نشاطا مضاداً للبكتيريا الموجبة لصبغة جرام والسالبة لصبغة جرام و15.63% من الاكتينوميسيتات الصحراوية أعطت نشاطا مضاداً للبكتيريا الموجبة لصبغة جرام والخميرة وكانت نسبة الاكتينوميسيتات الصحراوية التي أعطت نشاطا مضاداًَ للبكتيريا الموجبة لصبغة جرام والسالبة لصبغة جرام والخميرة 12.50%.
ولقد تم اختيار عشر كائنات للدراسات التالية على أساس مدى تأثير المادة النشطة بيولوجياً وكمية انتاجها والتى تشمل توصيف هذه الكائنات واستخلاص المادة من أفضل الكائنات إنتاجاً.
وقد تم توصيف الاكتينوميسيتات المختارة بدراسة الشكل الظاهرى وبعض الخصائص الفسيولوجية والبيوكيميائية. وأوضحت النتائج أنه من بين العشر كائنات هناك ثلاث عزلات تنتمى لجنس استربتوميسس، ثلاث لجنس نوكارديوبسس، عزلة واحدة تنتمي لجنس نوكارديا، عزلة واحدة تنتمي لجنس أميكولاتوبسس، عزلة واحدة تنتمي لجنس أكتينوماديورا وعزلة واحدة تنتمي لجنس ميكروتيتراسبورا.
تم إختيار الكائن D332 الاكثر نشاطاً وإنتاجية للمضاد الحيوى لاكمال الدراسة عليه بتعريفه حتي مستوي النوع وانتاج وعزل المضاد الحيوي. تم تعريف الكائن إلى مستوى النوع بدراسة تحليل الخلايا وتتابع القواعد النيتروجينية به. و قد أوضحت النتائج أن الكائن D332 يحتوي علي حامض ثنائى امينوبيميليك من النوع LL) ) ويحتوى علي نوعين من السكريات هما الجلوكوز والجلاكتوز ويحتوى علي ثلاثة أنواع من الدهون المميزة وهم فوسفاتيد الايثانولامين، فوسفاتيد اينوستول المانوسيد، فوسفاتيد الجليسرول. ولذلك تم تصنيف الكائن D332 ضمن جنس ستربتوميسز وقد تأكدت هذه النتائج بدراسة الحمض النووي والحصول علي الشجرة الوراثية للكائن التى أكدت أنه ينتمى لجنس استربتوميسز.
تم بعد ذلك انتاج وتنقية المادة الفعالة المضادة للميكروبات من الكائن D332 بتنميته علي وسط غذائى سائل وتم اختبار انتاج المضاد الحيوى في المزارع السائلة باستخدام طريقة الانتشار عبر حفر الأجار. ثم رشحت المزارع بعد ذلك وجمع الرشيح وتم خلطه مع أسيتات الايثيل بنسبة 1:1 و قد تم فصل الطبقة العضوية وتجميعها و تبخيرها حتى الجفاف تحت ضغط منخفّض بإستعمال المبخّر الدوّار للحصول على مستخلص خامّ. وقد تم اختبار قدرة المستخلص الخام علي إنتاج المضاد الحيوى باستخدام أقراص ورق ترشيح المحملة بالمستخلص الخام.
وبعد ذلك تم تنقية المستخلص الخام من الشوائب المصاحبة باستخدام الفصل الكروماتوجرافي علي الطبقة الرقيقة باستخدام خليط من هيبتان: أسيتات الايثيل (3: 2) كطور متحرك وقد تم الحصول علي المادة الفعالة في منطقة واحدة مما أثبت أن الكائن D332 يحتوي علي مركب واحد مضاد للبكتيريا الموجبة لصبغة جرام و السالبة لصبغة جرام والخميرة.