الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 109 |  |  |
| | | from | 109 | | |
Abstract
في هذه الدراسة ، تم الحصول على تسعة مسببات الأمراض البكتيرية من قسم الأحياء الدقيقة والمناعة ، كلية الطب ، جامعة المنصورة. كانت سلالتان من بكتيريا اي كولاي (واحد واثنين) ، سلالتان من الالتهاب الرئوي كلبسيلا (واحد واثنين) ، سلالتان بروتيوس (واحد واثنين) ، سلالتان من سيدوموناس (واحد واثنين) الإيروموناس. على الرغم من أن العزلات التسعة تم تحديدها وتميزها بواسطة متخصصين في كلية الطب ، فقد أخضعنا البكتيريا التسعة لمزيد من التحليل لتحديد الاختلافات بين كل سلالة تنتمي إلى نفس الجنس. من المعروف أن ثمان من العزلات تسبب أمراضًا مختلفة للإنسان ، وكان إيروموناس ممرضًا مشهورًا للأسماك وغير البشر. كانت القوة الدافعة الرئيسية هي القلق الشديد بشأن الانتشار الواسع لمقاومة المضادات الحيوية بين مسببات الأمراض البكتيرية البشرية. لا تشكل المقاومة المتعددة العقاقير تهديدًا كبيرًا لمحاربة مسببات الأمراض البكتيرية المعدية من قبل المجتمع الطبي فحسب ، بل إنها تُعقِّد الاستراتيجيات الشاملة للمسؤولين الصحيين لضمان وضع صحي للقوى العاملة والازدهار الاقتصادي للدول في جميع أنحاء العالم. إن ظهور آليات جديدة للمقاومة بواسطة البكتيريا المسببة للأمراض يحول الأجيال الحالية من المضادات الحيوية القديمة والمركبات غير الفعالة. وفي الوقت نفسه ، فإن البحث عن مركبات مضادة للجراثيم جديدة معقد بسبب سعر الاكتشاف والتطوير والوقت اللازم للتسويق. لذلك كان الإجراء الأول هو فحص البكتريا المسببة للأمراض التسع لمقاومتها لـ 19 من المضادات الحيوية المختلفة المستخدمة على نطاق واسع لعلاج هذه مسببات الأمراض البكتيرية. ثانياً ، درسنا قدرة بعض التقنيات الجزيئية في التمييز والتمايز بين عزلات من نفس النوع البكتيري مثل كولاي (واحد واثنين) ، سلالتان من الالتهاب الرئوي كليبسيلا (واحد واثنين) ، سلالتان من بروتيوس ميرابيليس (واحد واثنين) ، واثنين من سلالات سيدوموناس. كانت التقنيات الجزيئية المستخدمة هي أنماط ربط البروتين ، وبصمات الحمض النووي RAPD-PCR ، ومحتويات البلازميد. كان توطين الجينات المشفرة لمقاومة المضادات الحيوية جزءًا مهمًا للغاية من هذه الدراسة ؛ إما مشفرة بالبلازميد أو مشفرة بالكروموسومات. نتائجنا تشير إلى ذلك:
1- ثماني سلالات من أصل التسع المشمولة في هذه الدراسة كانت مقاومة للمضادات الحيوية الـ 19 التي تم اختبارها, أي أنها مقاومة للأدوية (MDR) المتعددة.2- تنتمي مسببات الأمراض البكتيرية الثمانية إلى أربعة أجناس / أنواع من البكتيريا ايروموناس. واي كولاي و كلبسيلا و بروتيوس و سييدوموناس. 3- اظهرت سلالة كلبسيلا الالتهاب الرئوي واحد فقط حساسية لقرص الميروبينيم المشبع بـ 10ug من الدواء. يمكن استخدام هذا المضاد الحيوي بشكل فعال لعلاج العدوى الناجمة عن هذه السلالة معينة من كلبسيلا. 4-تم استكشاف دور أنظمة التوكسين المضاد للسموم في آليات البكتيريا المقاومة للأدوية المتعددة ، ووجد أن سموم HicA التمهيدي كان إيجابيًا فقط مع سلالة اي كولاي1 وأنتج جزءًا واحدًا من الدنا حوالي 1000 نقطة أساس مختلفة عن حجم منتج PCR النموذجي 174bp. توجد متواليات النيوكليوتيدات التمهيدي لمضادات السموم HicB في جميع مسببات الأمراض البكتيرية التسعة التي تم اختبارها. شظايا الحمض النووي واضحة ومميزة مع الوزن الجزيئي من 1000bp تضخمت بواسطة هذا التمهيدي في جميع مسببات الأمراض البكتيرية التسعة. أظهر سلالة كليبسيلا واحدًا شريطًا إضافيًا من الحمض النووي بسعة 400 نقطة في البوصة ، وظهرت عصابة ساطعة مماثلة بسعة 200 نقطة أساس مع سلالة كولاي واحد. المنتج الوحيد PCR على مقربة من PCR النموذجي من HicB التمهيدي antitoxin هو الذي أنتج مع كلبسيلا سلالة واحدة. أنتج التمهيدي لجين التسمم HigA نطاقات مميزة من الحمض النووي مع سلالات سيدوموناس سلالة واحدة واثنتين ، سلالة كلبيسلا واحد ، وسلالة E. coli سلالة واحدة بحجم جزيئي " ~ " 250 نقطة أساس ؛ ما يقرب من نصف حجم المنتج النموذجي. تم العثور على سلاسل مطابقة HigB التمهيدي في أربعة من مسببات الأمراض البكتيرية التسعة. سلالة سيدوموناس واحدة (400bp باهتة و 750 bp حادة) كلبسيلا سلالة واحدة (110bp باهتة) ايروموناس منطقة متعددة خافتة وملطخة واي كولاي سلالة واحدة (شظايا متعددة الحمض النووي مع مختلف التنقل الكهربي: باهتة 1300 ، 2000 و 1200 حاد ، 800bps). أما بالنسبة لنظام التوكسين المضاد للسموم MazEF ، فقد وجد فقط في سلالة سيدوموناس واحد واي كولاي سلالة واحدة فقط. وكان حجم المنتج PCR 500bp مع سيدوموناس وثلاثة عصابات DNA مع E. coli سلالة واحدة تتحرك بمعدلات تساوي 200bp ، 350bp و 400bp. تحتوي جميع منتجات PCR على إمكانيات نقل كهربية أقل من 755 نقطة أساس.5- بعد تحديد أن جميع البكتيريا المعزولة خطيرة ويمكن تصنيفها على أنها MDR ؛ استخدمت التقنيات الجزيئية للتمايز والتمييز بين عزلتي كل نوع بكتيري. 6- تمكنت أنماط ربط البروتين في بعد واحد من اكتشاف الاختلافات الدقيقة بين عزلتي سيدوموناس و كلبسيلا و اي كولاي.7- تميز عدد محدود من الاشعال المستخدمة في بصمات الحمض النووي RAPD-PCR بين سلالتين كلبسيلا وسلالتي اي كولاي. 8- في الخلاصة ، يمكن أن يكون استخدام أدوات البيولوجيا الجزيئية مفيدًا في التمييز بين سلالات ذات صلة وثيقة بنفس البكتيريا.